因業(yè)務(wù)調(diào)整，部分個(gè)人測試暫不接受委托，望見諒。

檢測項(xiàng)目

樣品制備與均質(zhì)化處理：將咖啡樣品與無菌稀釋液按標(biāo)準(zhǔn)比例混合，通過機(jī)械均質(zhì)方式使樣品中微生物均勻分布，確保后續(xù)檢測步驟的代表性與準(zhǔn)確性，避免因樣品不均導(dǎo)致結(jié)果偏差。

系列稀釋操作：對均質(zhì)后的樣品進(jìn)行十倍梯度稀釋，制備不同濃度的檢測液，用于擴(kuò)大檢測范圍并確保最終結(jié)果落在可計(jì)數(shù)區(qū)間內(nèi)，降低過高或過低濃度造成的計(jì)數(shù)誤差。

乳酸膽鹽發(fā)酵管接種：將不同稀釋度的樣品液接種至含乳糖膽鹽的發(fā)酵管中，大腸菌群可分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，通過觀察發(fā)酵管內(nèi)氣泡產(chǎn)生情況初步判斷是否存在目標(biāo)菌群。

煌綠乳糖膽鹽肉湯驗(yàn)證：對初篩產(chǎn)氣的發(fā)酵管進(jìn)行轉(zhuǎn)種驗(yàn)證，利用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)一步確認(rèn)大腸菌群特性，排除其他非目標(biāo)菌群的干擾，提高檢測特異性。

最可能數(shù)計(jì)算結(jié)果判定：根據(jù)驗(yàn)證后陽性管數(shù)目及分布，查對MPN統(tǒng)計(jì)表計(jì)算樣品中大腸菌群的最可能數(shù)值，以單位體積內(nèi)菌群數(shù)量形式呈現(xiàn)最終定量結(jié)果。

陽性菌株分離純化：對驗(yàn)證陽性樣品進(jìn)行劃線分離，獲取單一菌落并進(jìn)行純培養(yǎng)，為后續(xù)進(jìn)一步鑒定或保存菌種提供基礎(chǔ)。

革蘭氏染色鏡檢：對分離純化后的菌株進(jìn)行革蘭氏染色，通過顯微鏡觀察菌體形態(tài)及染色特性，輔助確認(rèn)大腸菌群的典型特征。

生化反應(yīng)鑒定：對疑似菌落進(jìn)行吲哚、甲基紅、VP試驗(yàn)及檸檬酸鹽利用等生化試驗(yàn)，全面驗(yàn)證大腸菌群的代謝特性，確保鑒定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

檢測環(huán)境無菌監(jiān)控：全程設(shè)置空白對照及環(huán)境監(jiān)測樣本，確保檢測操作環(huán)境及試劑無菌，避免交叉污染或假陽性結(jié)果產(chǎn)生。

檢測結(jié)果不確定度評估：根據(jù)稀釋步驟、計(jì)數(shù)方法及操作重復(fù)性等因素，對最終MPN值進(jìn)行不確定度計(jì)算，客觀反映檢測結(jié)果的置信區(qū)間。

檢測范圍

烘焙咖啡豆：經(jīng)高溫烘焙處理的咖啡原料，可能因后期儲(chǔ)存或運(yùn)輸環(huán)節(jié)污染大腸菌群，需檢測確保其衛(wèi)生質(zhì)量符合食品安全標(biāo)準(zhǔn)。

咖啡粉制品：咖啡豆經(jīng)研磨后制成的粉狀產(chǎn)品，具有較大比表面積，易受微生物污染，需通過檢測控制大腸菌群數(shù)量。

速溶咖啡顆粒：通過萃取及干燥工藝制成的即溶產(chǎn)品，生產(chǎn)過程中可能引入微生物，需監(jiān)控大腸菌群指標(biāo)保障飲用安全。

咖啡萃取液：咖啡豆經(jīng)水提取制成的液體產(chǎn)品，富含營養(yǎng)物質(zhì)且水分活度高，適宜微生物生長，需嚴(yán)格進(jìn)行衛(wèi)生指標(biāo)檢測。

咖啡膠囊內(nèi)容物：密封于膠囊內(nèi)的咖啡粉末或濃縮液，需檢測包裝前內(nèi)容物衛(wèi)生狀況，防止因污染導(dǎo)致產(chǎn)品變質(zhì)。

咖啡豆儲(chǔ)存環(huán)境樣品：咖啡原料倉儲(chǔ)區(qū)域的空氣、設(shè)備表面拭子等環(huán)境樣本，用于追溯污染源及評估衛(wèi)生控制效果。

咖啡加工設(shè)備沖洗水：生產(chǎn)線上設(shè)備及管道的清洗水樣，通過檢測大腸菌群評估清洗消毒程序的有效性及衛(wèi)生狀況。

咖啡飲料終產(chǎn)品：可直接飲用的咖啡類飲料，需進(jìn)行大腸菌群檢測以確保產(chǎn)品在保質(zhì)期內(nèi)的微生物安全性。

咖啡副產(chǎn)品原料：咖啡渣等副產(chǎn)品如用于其他用途，需根據(jù)應(yīng)用領(lǐng)域要求進(jìn)行相應(yīng)的衛(wèi)生指標(biāo)檢測與控制。

咖啡包裝材料：與咖啡產(chǎn)品直接接觸的內(nèi)包裝材料，需檢測表面衛(wèi)生狀況，防止因包裝污染導(dǎo)致產(chǎn)品微生物超標(biāo)。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

GB 4789.3-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì)數(shù)》：規(guī)定了食品中大腸菌群MPN計(jì)數(shù)的檢驗(yàn)方法，包括樣品處理、接種、培養(yǎng)及結(jié)果報(bào)告要求，適用于各類食品的衛(wèi)生指標(biāo)檢測。

ISO 4831:2006《Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection and enumeration of coliforms - Most probable number technique》：國際標(biāo)準(zhǔn)化組織發(fā)布的食品和動(dòng)物飼料微生物檢測標(biāo)準(zhǔn)，提供了大腸菌群檢測和計(jì)數(shù)的水平方法及最可能數(shù)技術(shù)規(guī)范。

FDA BAM: Chapter 4: Enumeration of Escherichia coli and the Coliform Bacteria：美國食品藥品管理局細(xì)菌學(xué)分析手冊中關(guān)于大腸桿菌和大腸菌群計(jì)數(shù)的章節(jié)，提供了詳細(xì)的檢測程序與結(jié)果解釋指南。

ISO 7251:2005《Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection and enumeration of presumptive Escherichia coli - Most probable number technique》：針對推定大腸桿菌檢測和計(jì)數(shù)的國際標(biāo)準(zhǔn)，采用最可能數(shù)技術(shù)，適用于食品和動(dòng)物飼料樣品。

GB/T 5750.12-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 微生物指標(biāo)》：生活飲用水及其水源水中微生物指標(biāo)的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，包含大腸菌群的多管發(fā)酵法檢測方法，適用于相關(guān)水質(zhì)樣品。

檢測儀器

無菌均質(zhì)器：通過高速攪拌與破碎作用將咖啡樣品與稀釋液在密閉無菌袋中均質(zhì)化，確保樣品中微生物分布均勻，提高檢測代表性并防止交叉污染。

生物安全柜：提供局部潔凈空氣環(huán)境及物理隔離屏障，用于樣品處理、稀釋及接種等操作，保護(hù)操作人員及樣品免受微生物污染，確保檢測過程生物安全。

恒溫培養(yǎng)箱：提供穩(wěn)定且均勻的溫度控制環(huán)境，用于大腸菌群發(fā)酵管的培養(yǎng)，確保微生物在適宜溫度下生長繁殖，保證生化反應(yīng)順利進(jìn)行與結(jié)果可靠性。

高壓蒸汽滅菌器：利用高溫高壓飽和蒸汽對培養(yǎng)基、稀釋液及實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行滅菌處理，徹底殺滅所有微生物包括芽孢，確保檢測所用材料無菌，避免假陽性結(jié)果。

微生物比濁計(jì)：通過測量菌懸液對特定波長光的散射或吸收程度來快速估算微生物濃度，用于制備標(biāo)準(zhǔn)菌液或評估菌株生長情況，輔助定量檢測操作。

檢測流程

1、咨詢：提品資料(說明書、規(guī)格書等)

2、確認(rèn)檢測用途及項(xiàng)目要求

3、填寫檢測申請表(含公司信息及產(chǎn)品必要信息)

4、按要求寄送樣品(部分可上門取樣/檢測)

5、收到樣品，安排費(fèi)用后進(jìn)行樣品檢測

6、檢測出相關(guān)數(shù)據(jù)，編寫報(bào)告草件，確認(rèn)信息是否無誤

7、確認(rèn)完畢后出具報(bào)告正式件

8、寄送報(bào)告原件