因業(yè)務(wù)調(diào)整，部分個人測試暫不接受委托，望見諒。

檢測項目

樣本DNA提取：使用標(biāo)準(zhǔn)化方法從臨床或環(huán)境樣本中分離純化DNA，確保模板質(zhì)量和高純度，為后續(xù)PCR擴增提供可靠基礎(chǔ)，避免降解或污染影響結(jié)果。

引物設(shè)計與驗證：針對支原體特異性基因序列設(shè)計引物，并通過生物信息學(xué)工具驗證其特異性和效率，確保擴增目標(biāo)區(qū)域而無交叉反應(yīng)，提高檢測準(zhǔn)確性。

PCR反應(yīng)體系優(yōu)化：調(diào)整反應(yīng)組分如引物濃度、鎂離子水平和模板量，以獲得最佳擴增條件，減少非特異性擴增并增強信號強度，保證檢測靈敏度。

陽性對照設(shè)置：包含已知支原體DNA的對照樣本，用于監(jiān)控PCR反應(yīng)的有效性和試劑性能，確保整個檢測過程的可靠性和重復(fù)性。

陰性對照設(shè)置：使用無模板對照或無關(guān)DNA樣本，檢測可能存在的污染或假陽性結(jié)果，維護檢測特異性和實驗室質(zhì)量控制。

實時熒光監(jiān)測：通過熒光信號實時跟蹤PCR擴增過程，評估反應(yīng)動力學(xué)和閾值循環(huán)數(shù)，用于定量分析和早期產(chǎn)物檢測，提高檢測效率。

熔解曲線分析：在擴增后通過溫度梯度分析產(chǎn)物熔解特性，驗證擴增產(chǎn)物的特異性和純度，區(qū)分非特異性條帶并確保結(jié)果可靠性。

凝膠電泳驗證：使用瓊脂糖凝膠分離PCR產(chǎn)物，通過條帶大小和強度確認擴增成功與否，輔助可視化結(jié)果并排除假陰性。

定量標(biāo)準(zhǔn)曲線構(gòu)建：基于已知濃度標(biāo)準(zhǔn)品建立線性關(guān)系，用于絕對定量支原體負載，評估感染程度并提供數(shù)值化結(jié)果。

結(jié)果判讀與報告：綜合分析擴增數(shù)據(jù)、對照結(jié)果和標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成客觀檢測報告，確保結(jié)果符合臨床或研究要求，避免主觀誤差。

檢測范圍

臨床呼吸道樣本：包括痰液、支氣管肺泡灌洗液和鼻咽拭子，用于診斷呼吸道支原體感染，評估患者癥狀和流行病學(xué)調(diào)查。

泌尿生殖道樣本：如尿液、宮頸分泌物和前列腺液，檢測泌尿生殖道支原體感染，支持性健康診斷和治療監(jiān)測。

血液樣本：用于系統(tǒng)性支原體感染檢測，尤其在敗血癥或免疫抑制患者中，需高效DNA提取以避免低濃度目標(biāo)。

組織活檢樣本：從感染部位獲取的組織塊，用于局部支原體定植分析，支持病理學(xué)研究和診斷確認。

環(huán)境水樣：包括飲用水、廢水和自然水源，監(jiān)測支原體污染情況，評估公共衛(wèi)生風(fēng)險和 water safety。

食品和飼料樣本：檢測食品中的支原體污染，確保食品安全和動物飼料衛(wèi)生，預(yù)防食源性疾病傳播。

動物源性樣本：如獸醫(yī)診斷中的動物組織、血液或分泌物，用于動物支原體病監(jiān)測和控制 zoonotic 風(fēng)險。

細胞培養(yǎng)物：檢測細胞系或培養(yǎng)液中的支原體污染，確保細胞實驗的純凈性和生物制品安全性。

藥品和生物制劑：包括疫苗、血液制品和 therapeutic 產(chǎn)品，進行無菌測試和微生物負載評估，符合 regulatory 要求。

空氣樣本：通過空氣采樣器收集的氣溶膠或顆粒物，監(jiān)測空氣中的支原體存在，用于環(huán)境健康研究。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

ISO 22174:2005：微生物學(xué)中的分子檢測通用要求和定義，適用于食物鏈樣本的支原體PCR檢測，規(guī)范樣本處理和擴增條件。

GB/T 37871-2019：醫(yī)用分子生物學(xué)檢測方法通則，提供臨床樣本PCR檢測的標(biāo)準(zhǔn)化流程，確保結(jié)果準(zhǔn)確性和可比性。

ASTM E2885-13：核酸序列擴增技術(shù)的驗證指南，用于支原體PCR方法的開發(fā)和質(zhì)量控制，涵蓋特異性、靈敏度和重復(fù)性評估。

ISO 15189:2012：醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力要求，涉及PCR檢測的全過程管理，包括人員培訓(xùn)、設(shè)備校準(zhǔn)和結(jié)果報告。

GB 19489-2008：實驗室生物安全通用要求，確保支原體PCR檢測在安全環(huán)境下進行，防止生物污染和職業(yè)暴露。

檢測儀器

PCR擴增儀：用于DNA模板的 thermocycling 擴增，控制溫度和時間參數(shù)，實現(xiàn)支原體特異性序列的高效復(fù)制，是檢測核心設(shè)備。

離心機：用于樣本預(yù)處理和DNA提取中的離心分離，提供高速旋轉(zhuǎn)以沉淀細胞碎片和雜質(zhì)，確保模板純凈性。

核酸提取儀：自動化處理樣本進行DNA純化，集成裂解、結(jié)合和洗脫步驟，提高提取效率和一致性，減少人為誤差。

電泳系統(tǒng)：包括電泳槽和電源，用于PCR產(chǎn)物分析通過凝膠分離，驗證擴增條帶大小和特異性，輔助結(jié)果確認。

實時熒光PCR儀：監(jiān)測擴增過程中的熒光信號變化，實現(xiàn)實時定量和熔解曲線分析，提供高靈敏度檢測和動力學(xué)數(shù)據(jù)。

超凈工作臺：提供無菌操作環(huán)境，防止樣本交叉污染和外來DNA引入，確保PCR反應(yīng)的特異性和準(zhǔn)確性。

微量分光光度計：測量提取DNA的濃度和純度，通過吸光度值評估模板質(zhì)量，為PCR反應(yīng)提供標(biāo)準(zhǔn)化輸入。

檢測流程

1、咨詢：提品資料(說明書、規(guī)格書等)

2、確認檢測用途及項目要求

3、填寫檢測申請表(含公司信息及產(chǎn)品必要信息)

4、按要求寄送樣品(部分可上門取樣/檢測)

5、收到樣品，安排費用后進行樣品檢測

6、檢測出相關(guān)數(shù)據(jù)，編寫報告草件，確認信息是否無誤

7、確認完畢后出具報告正式件

8、寄送報告原件